ម៉ូលេគុលវិភាគ: ពេលវេលាពិតប្រាកដ PCR

បច្ចុប្បន្ននេះការរចនាយន្តការម៉ូលេគុលការវិនិច្ឆ័យប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ polymerase (PCR) ដែលជាកម្លាំងរុញច្រានសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍនៃការធំចំនួននៃ វិធីសាស្រ្តនៃការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ នៃជំងឺ, មូលដ្ឋាននៅលើការប្តេជ្ញាចិត្តនៃហ្សែនសម្ភារៈ។ សម្រាប់ការយកចេញពេលវេលាពិតប្រាកដ PCR ការប្រើបំណែកហ្សែន (ជាពិសេសនៅក្នុង ទឹកអាស៊ីត nucleic នេះ) នៃភ្នាក់ងារបណ្តាលដែលមិនត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងបុគ្គលផ្សេងទៀត។

គោលការណ៍នៃការ PCR នេះគឺគុណនៃ DNA ដែលធាតុបង្កជំងឺរាប់លានបំណែកមួយចំនួននៃដងដោយ polymerase DNA នៅក្នុងអង្គភាពពិសេសសំដៅដល់ថាជា cycler កម្ដៅដែលផ្តល់នូវពាក្យផ្ទួនរង្វិលនៃរបបសីតុណ្ហាភាពសម្រាប់កម្មវិធីដែលបានផ្តល់ឱ្យ។

ការវិនិច្ឆ័យ PCR អនុញ្ញាតឱ្យដើម្បីធ្វើឡើងវិញស៊េរីនៃ amplification មួយដែលរក្សាបាននូវសកម្មភាពអង់ស៊ីមនេះ។ នៅពេលដែលការបំភ្លឺលម្អិតដែលបានកើតឡើងយ៉ាងរលូន, នៅក្នុងវដ្តមួយចំនួននៃច្បាប់ចម្លងនៃដុំពិសេសនៃ DNA របស់គូធាតុបង្កជំងឺនេះ, បន្ទាប់ពីសាមសិបវដ្ត - មួយរយដប់ឆ្នាំ។ នោះជាមូលហេតុដែល PCR ត្រូវបានប្រើក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យដើម្បីកំណត់ធាតុបង្កជំងឺឱ្យបានគ្រប់គ្រាន់តូច, ការកំណត់អត្តសញ្ញាណនៃការដែលមិនអាចទៅរួចទេដោយគ្មានវា។

វាគួរតែត្រូវបានកត់សម្គាល់ថា RNA ដែលមិនអាចជាពុម្ពមួយសម្រាប់ PCR នៅក្នុងពេលវេលាពិតប្រាកដ។ ដូច្នេះនៅក្នុងគោលបំណងដើម្បីរកឱ្យឃើញ RNA មេរោគមុនពេលបំភ្លឺលម្អិតដែលបានដើម្បីទទួលបានការទាក់ទងទៅនឹង DNA បានបំណែកដែលត្រូវគ្នារបស់វា។ ប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ polymerase នេះបានអនុញ្ញាតឱ្យផលិត DNA និង RNA ធាតុបង្កជំងឺការវាស់វែង។ ពទទួលបានដូច្នេះត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យពីប្រសិទ្ធភាពនៃការព្យាបាលដោយបានប្រើនិងវាយតម្លៃនៃការព្យាករណ៍ព្យាបាលនេះ។

លើសពីនេះទៀតពេលវេលាពិតប្រាកដ PCR មិនតម្រូវឱ្យមានសកម្មភាពបន្ថែមទៀតដោយគោរពតាមអ៊ិនគ្រីបនៃ DNA បានគោលដៅឬ amplicons ដែលបានបម្រើជាឧបសគ្គក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យត្រឹមត្រូវមួយហើយនាំឱ្យមានលទ្ធផលមិនពិត។ វិធីសាស្រ្តនេះធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានមិនឱ្យប្រើជំហាន electrophoresis ដែលនាំឱ្យមានការកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃផលិតផលនៃប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ polymerase ។ ដូចគ្នានេះផងដែរដោយសារតែការថយចុះនៃចំនួនល្បិចកលជាមួយភ្នាក់ងារដែលបានកាត់បន្ថយពេលវេលានៃការស្ទង់មតិនេះ, វាសម្រួលដំណើរការនេះជួយកាត់បន្ថយលទ្ធភាពនៃកំហុស។ PCR ផងដែរអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកបញ្ជាក់ចំនួននៃច្បាប់ចម្លងដំបូង DNA នៃធាតុបង្កជំងឺនេះនៅក្នុងការស្រាវជ្រាវមួយដើម្បីជួយកំណត់រយៈពេលនៃការធ្ងន់ធ្ងរនិងដើម្បីចាត់វិធានការឱ្យបានទាន់ពេលវេលាដើម្បីព្យាបាលអ្នកជំងឺ។

សព្វថ្ងៃនេះមានមួយចំនួនធំនៃវិធីសាស្រ្តនៃការញៀននឹងប្រភពផ្សព្វផ្សាយក្នុងការបំភ្លឺលម្អិតពេលវេលាពិតប្រាកដ។ ជាទូទៅត្រូវបានគេប្រើច្រើនបំផុតអនុវត្តបច្ចេកទេសនានាជាប់ទាក់ទងជាមួយ fluorogenic amplicon ការស៊ើបអង្កេតជាវិទ្យុសកម្មអាំងតង់ស៊ីតេនៃការដែលផ្សេងគ្នាអាស្រ័យលើការប្រមូលផ្តុំនៃ amplicon និងថតក្នុងពេលជាក់លាក់ដោយមធ្យោបាយនៃការពិសេសឧបករណ៍ការហៅទូរស័ព្ទ thermocycler ជាមួយអុបទិកម៉ូឌុល។ វាផ្ដល់នូវកម្រិតខ្ពស់នៃភាពប្រែប្រួលនៃការវិភាគ។ នៅក្នុងផលិតផល PCR ដូចគ្នាអាចត្រូវបានរកឃើញរួមជាមួយបរិមាណធំនៃផលិតផលដោយ, នៅពេលដែលការប្រើ electrophoresis វានៅក្នុងករណីមួយចំនួនមិនត្រូវបានកត់សម្គាល់ឃើញ។

ដោយ PCR ដោយប្រើគំរូត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាននិងអវិជ្ជមាននៅក្នុងពេលវេលាពិតប្រាកដ។ ដូច្នេះគំរូវិជ្ជមាននិងអវិជ្ជមាននៅក្នុងការសិក្សាមួយបានវិភាគដូចគំរូដាច់ដោយឡែក, គំរូវត្ថុបញ្ជាមួយម្ល៉ោះបានឧទ្ទេសនាមនៅគំរូដូចគ្នានិងឆ្លងកាត់ជំហានវិភាគទាំងអស់។

សព្វថ្ងៃនេះមានមួយចំនួនធំនៃឧបករណ៍សម្រាប់ការយកចេញពី ខ្សែច្រវាក់ប្រតិកម្ម polymerase ។ ទាំងនេះរួមបញ្ចូលទាំងជីវ Rad, អនុវត្ត Biosystems, Cepheid និងរក្សាទំនេរនៅឡើយ។ គ្នានៃពួកគេមានគុណសម្បត្តិនិងគុណវិបត្តិ

វាគួរតែត្រូវបានកត់សម្គាល់ថា PCR នេះ - វិធីសាស្រ្តនៃការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យត្រូវបានប្រើក្នុងទ្រង់ទ្រាយធំវិទ្យាសាស្រ្តស្រាវជ្រាវនិងមជ្ឈមណ្ឌលរោគវិនិច្ឆ័យនៅជុំវិញពិភពលោកដោយសារតែវាផ្តល់នូវឱកាសដើម្បីអនុវត្តការបកស្រាយជាបន្ទាន់នៃលទ្ធផល។